梅毒病程長，癥狀復雜，與很多非梅毒性疾病的表現有相似之處，因此必須結合病史、臨床表現及實驗室檢查結果，進行綜合分析，必要時還須進行家屬調查，追蹤觀察和試驗治療，以便作出正確診斷。 （一）病史有無婚外性亂史（包括時間、性伴侶性病情況）。現病史及既往曾否患過硬下疳、二期、三期梅毒，或患過其它性傳播疾病。配偶有無梅毒及性傳播病史。有無早產、死產史、疑為先天梅毒應詢問其父母的性病史及兄弟姊妹的健康狀況。是否接受過抗梅毒治療（藥物及劑量）。 （二）體檢 應作系統全面檢查，早期應注意檢查皮膚、粘膜，特別是掌跖、陰部、肛門等處。晚期除注意皮膚粘膜外，還應注意心血管和神經系統。 （三）實驗室檢查 1．梅毒螺旋體檢查 適用于早期梅毒皮膚粘膜損害，如硬下疳、濕丘疹、扁平濕疣等。其中硬下疳尤為重要，因梅毒血清反應在硬下疳出現2～3周始呈陽性。 （1）暗視野檢查：為最常應用的螺旋體檢查方法，其原理為在裝有暗視野集光器的顯微鏡下，視野中無直接光線，光只能從四周透入，當接物鏡下無物體存在時，視野始終保持黑色，當有物體時，則從四周透人的光線射到物體上，物體將光線折射在目鏡方向而發生光亮，從而觀察到螺旋體的形態及運動特征。 （2）直接熒光抗體檢查法：取患者皮損瘡面血清，干燥后加兔抗人梅毒螺旋體熒光抗體，其原理為瘡面血清中梅毒螺旋體與兔抗人梅毒螺旋體發生特異性結合，在熒光顯微鏡下觀察，可見梅毒螺旋體呈亮綠色熒光，其它種類螺旋體不發光，此法特異性高，也可用于口腔梅毒損害的檢查，但缺點為敏感性差。 （3）涂片染色檢查法：可用鍍銀染色法，螺旋體染成棕黑色，背景為黃色。 2．梅毒血清學試驗 為診斷梅毒必需的檢查方法，對潛伏梅毒，患者血清學的診斷尤為重要。梅毒螺旋體感染人體后，可產生兩種抗體。非特異性的抗心脂質抗體，可用牛心脂質檢測出，稱非梅毒螺旋體抗原血清反應（梅毒螺旋體蛋白+人脂質抗原 一 抗心脂質抗原 一抗心脂質抗體十心脂質抗原 一 非螺旋體抗原梅毒血清反應）；抗梅毒螺旋體抗體可用梅毒螺旋體（活的或死的梅毒螺旋體或其成分）檢測出來，稱梅毒螺旋體抗原血清反應（梅毒螺旋體特異抗原-一刺激機體 一 抗梅毒螺旋體抗體十梅毒螺旋體抗原 一 螺旋體抗原梅毒血清反應）。非螺旋體抗原血清反應為非特異性梅毒血清反應，不是梅毒的特異性反應，但大多數梅毒患者可發生此種陽性反應，方法簡便；敏感性高，故可作為常規試驗及篩選試驗。此外可作定量試驗，用于療效觀察。復發或再感染的判斷。 　　常用的非螺旋體抗原血清反應有：①性病研究室玻片試驗（venereal disease laboratory slide test，VDRL）；②血清不加熱反應素試驗（unheated serum reagin，USR）；③快速血漿反應素環狀卡片試驗（rapid p1asma reagin circle card test，RPR）等。螺旋體抗原梅毒血清反應敏感性及恃異性均高，用作證實試驗，判斷非梅毒螺旋體試驗陽性的真假性。缺點為此項試驗費用高，需較高的設備條件，而且即使患者經足夠的抗梅毒治療后，血清反應亦不陰轉或降低，故不適用于療效觀察、復發及再感染的判斷。 　　常用的螺旋體抗原血清反應有：①熒光螺旋體抗體血清試驗（fluorescent treponema1 antibodyabsorption test，FTA-ABS test）；②梅毒螺旋體血凝試驗（treponema pallidum hemagg1utination assay，TPHA）；③酶聯免疫吸附試驗（ELISA）等。臨床上診斷或懷疑梅毒時，一般先用非螺旋體抗原血清反應（USR或RPR）作篩選檢查，如果陰性，即可否定梅毒，只有在懷疑梅毒才作進一步檢查。如果為陽性，且病史及體檢符合梅毒者，即可以確定診斷。病史及體檢不符合梅毒者，應進一步作梅毒螺旋體血清反應，如FTA-ABS試驗，以除外生物學假陽性反應。 3．腦脊液檢查 以除外神經梅毒，檢查項目包括細胞計數、總蛋白測定、VDRL試驗及膠體金曲線。