一、細(xì)菌學(xué)檢查： 　　 　　嗜血桿菌屬革蘭氏陰性桿菌，培養(yǎng)條件顯示多形性特征，易染性，此菌無芽孢，無運(yùn)動(dòng)。 　　 　　1．鏡檢：從軟下疳開放性潰瘍?nèi)〔耐科瑯?biāo)本染色，杜克雷嗜血菌易檢出，未破潰病灶從膿腫或橫痃中穿刺，取其穿刺液涂片標(biāo)本染色也易檢出，更為典型，用美藍(lán)染色或革蘭氏染色等鏡檢用10×100倍油浸觀察。 　　 　　2．培養(yǎng)檢查：軟下疳菌分離培養(yǎng)較為困難，故在采取病變材料時(shí)應(yīng)注意取軟下疳潰瘍邊緣下貯留膿汁或穿刺橫痃抽吸的膿汁作為檢體，或再用生理鹽水充分洗滌潰瘍底面后，再用生理鹽水濕棉簽涂抹標(biāo)本送化驗(yàn)室培養(yǎng)。 　　 　　國際上軟下疳的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基一種是GCHGS（Hammond gonococcal media），由淋球菌瓊脂培養(yǎng)基加牛血紅蛋白、胎牛血清、萬古霉素及纖維素、氨基酸等組成；另外一種是MHHb（Muller-Hinton瓊脂，由Muller-Hinton 瓊脂、馬血、萬古霉素及其他培養(yǎng)成份組成），上述兩種培養(yǎng)基可以同時(shí)應(yīng)用，以提高陽性率。 　　 　　菌落常于接種后24-48小時(shí)形成。色灰黃而透亮，直徑約為1-2mm。從菌落處取材作革蘭染色陰性，為成雙的短桿菌，成鏈狀排列。同時(shí)應(yīng)作生化反應(yīng)以鑒定之。主要有：氧化酶試驗(yàn)弱陽性，過氧化酶試驗(yàn)陰性，非卟啉試驗(yàn)陰性，硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性，鹼性磷酸酶試驗(yàn)陽性。 　　 　　杜克雷嗜血桿菌的培養(yǎng)不僅有助于診斷，而且可確定分離的細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性，目前已分離出耐抗生素的杜克雷嗜血桿菌。 　　 　　二、血清學(xué)診斷軟下疳 　　 　　感染桿克雷嗜血桿菌能產(chǎn)生抗體，通過血清學(xué)檢查，不論是補(bǔ)體結(jié)合，凝集反應(yīng)以及熒光抗體間接法等均可證實(shí)，但尚未推廣，目前認(rèn)為IgM抗體敏感性為74%，IgG抗體敏感性為94%，其特異性分別為84%和64%。 　　 　　三、PCR檢測(cè)杜克雷嗜血桿菌。